Παγιδευμένοι σε μια φυλακή στην οποία κάθε δωμάτιο έχει τέσσερις πόρτες αλλά φαινομενικά καμία έξοδο, οι παίκτες πρέπει να προσπαθήσουν να βρουν το Δωμάτιο 25, την υποτιθέμενη έξοδο από αυτόν τον εφιάλτη.

Αλλά μερικοί ανάμεσα τους μπορεί να είναι φρουροί της φυλακής, περιμένοντας την σωστή στιγμή για να χτυπήσουν. Στο συνεργατικό παιχνίδι Room 25, δεν θέλουν όλοι να αποδράσουν από τη φυλακή - αλλά ποιός είναι ο προδότης;